液相色谱
更新时间：2012-11-24 点击次数： 2231次
液相色谱
液相色谱也叫层析法，它是一种能的物理分离技术，将它用于分析化学并配合适当的检测手段，就成为色谱分析法。
液相色谱的zui早应用是用于分离植物色素，其方法是这样的：在一玻璃管中放入碳酸钙，将含有植物色素（植物叶的提取液）的石油醚倒入管中。此时，玻璃管的上端立即出现几种颜色的混合谱带。然后用纯石油醚冲洗，随着石油醚的加入，谱带不断地向下移动，并逐渐分开成几个不同颜色的谱带，继续冲洗就可分别接得各种颜色的色素，并可分别进行鉴定。色谱法也由此而得名。 现在的色谱法早已不局限于色素的分离，其方法也早已得到了极大的发展，但其分离的原理仍然是一样的。我们仍然叫它色谱分析。 一、色谱分离基本原理： 由以上方法可知，在色谱法中存在两相，一相是固定不动的，我们把它叫做固定相；另一相则不断流过固定相，我们把它叫做流动相。 色谱法的分离原理就是利用待分离的各种物质在两相中的分配系数、吸附能力等亲和能力的不同来进行分离的。 使用外力使含有样品的流动相（气体、液体）通过一固定于柱中或平板上、与流动相互不相溶的固定相表面。当流动相中携带的混合物流经固定相时，混合物中的各组分与固定相发生相互作用。 由于混合物中各组分在性质和结构上的差异，与固定相之间产生的作用力的大小、强弱不同，随着流动相的移动，混合物在两相间经过反复多次的分配平衡，使得各组分被固定相保留的时间不同，从而按一定次序由固定相中先后流出。与适当的柱后检测方法结合，实现混合物中各组分的分离与检测。 二、色谱分类方法： 色谱分析法有很多种类，从不同的角度出发可以有不同的分类方法。 从两相的状态分类： 色谱法中，流动相可以是气体，也可以是液体，由此可分为气相色谱法（GC）和法（LC）。固定相既可以是固体，也可以是涂在固体上的液体，由此又可将气相色谱法和法分为气-液色谱、气-固色谱、液-固色谱、液-液色谱。 法是继气相色谱之后，70年代初期发展起来的一种以液体做流动相的新色谱技术。 是在气相色谱和经典色谱的基础上发展起来的。现代和经典没有本质的区别。不同点仅仅是现代比经典有较高的效率 和实现了自动化 操作。经典的法，流动相在常压下输送，所用的固定相柱效低，分析周期长。而现代法引用了气相色谱的理论，流动相改为高压输送（zui高输送压力可达4.9107Pa）;色谱柱是以特殊的方法用小粒径的填料填充而成，从而使柱效大大高于经典（每米塔板数可达几万或几十万）；同时柱后连有高灵敏度的检测器，可对流出物进行连续检测。因此，具有分析速度快、分离效能高、自动化等特点。所以人们称它为高压、高速、或现代法。
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